农业生物技术学报

作者：张丽, 李杰, 付琳, 刘丽, 杨恒, 王高富, 任航行, 周鹏, 董贤文

单位：1 重庆市畜牧科学院/重庆市山羊工程技术研究中心 ,荣昌 402460; 2 重庆化工职业学院 ,长寿 401228; 3 西南大学 动物医学院 ,荣昌 402460

关键词：长链非编码 RNA (LncRNA),黑色素沉积,乌质性状,酉州乌羊,

基金：国家自然科学基金(32002206); 重庆市自然科学基金重点研发项目(cstc2020jcyj-zdxmX0005); 重庆市市级财政 资金项目(01010106)

长链非编码 RNA (long noncoding RNA, LncRNA)是一类长度大于 200 个核苷酸且不能编码蛋 白质的 RNA，可通过多种调控途径作用于皮肤恶性黑色素瘤的增殖、侵袭和转移等。为探究酉州乌羊 (Capra hircus) LncRNA TCONS_00153149 基因在黑色素沉积过程的调控作用及分子机制，本研究以酉州乌羊和渝东白山羊为对象，验证 LncRNA TCONS_00153149在不同肤色山羊组织的表达特性，同时分析其在小鼠(Mus musculus) B16-F10 黑色素细胞分化阶段的表达特征，通过构建 LncRNA TCONS_00153149 的慢 病毒表达载体，转染 B16-F10 黑色素细胞，探究 LncRNA TCONS_00153149 对黑色素沉积的调控作用。结 果显示 LncRNA TCONS_00153149 在酉州乌羊和渝东白山羊不同组织中均有不同程度的表达，且酉州乌 羊皮肤组织中的相对表达量极显著高于渝东白山羊(P＜0.01)；LncRNA TCONS_00153149的表达在黑色素细胞分化前期呈上升趋势，分化第3天相对表达量达到最高，其后呈递减趋势，在分化第7 天达到最低，其在第 3 天的相对表达量极显著高于分化第 0、1 和 7 天(P＜0.01)；转染 B16-F10 细胞发现，与转空载体组 (negative control group, NC)相比，转染 LncRNA TCONS_00153149 基因的黑色素细胞中，LncRNA TCONS_ 00153149 基因相对表达量极显著提高(P＜0.01)，黑色素含量显著升高，这些结果验证了 LncRNA TCONS_00153149 基 因 对 黑 色 素 沉 积 的 显 著 促 进 作 用 。 同 时 ，黑 色 素 沉 积 相 关 基 因 酪 氨 酸 酶 相 关 蛋 白 1 (TYRosinase related protein 1, TYRP1)、小眼畸形转录因子(microphthalmia-associated transcription factor, MITF)、酪氨酸酶相关蛋白 2 基因(TYRosinase-related protein 2, TYRP2)相对表达量显著升高(P＜0.05)， Agouti 信号蛋白(agouti signaling protein, ASIP)相对表达量极显著降低(P＜0.01)。结合 Inta RNA2.0.0 软 件分析 LncRNA TCONS_00153149 与色素关键基因的互作结果，本研究推测 LncRNA TCONS_00153149 基 因可能是通过靶向增强黑色素候选基因(TYRP1, TYRP2, MITF, ASIP 基因等)的功能，正向调控黑色素的沉积。本研究为明确山羊皮肤着色相关的LncRNA调控理论的研究提供了基础资料。

来源：2022年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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