农业生物技术学报

作者：董金杰, 王会宝, 王凡, 邓瑞雪, 刘萍, 陈苗苗, 李扬帆, 张勇

单位：1 甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070; 2 中农威特生物科技股份有限公司,兰州 730046; 3 中国农业科学院 兰州兽医研究所,兰州730046; 4 甘肃省动物生理学和生殖调控重点实验室

关键词：口蹄疫病毒,结构蛋白VP1 (VP1),mRNA疫苗,免疫原性,

基金：甘肃省青年科技基金计划(20JR10RA475); 甘肃省动物生理学和生殖调控重点实验室(20JR10RA563)

口蹄疫(Foot-and-mouth disease, FMD)是危害养猪(Sus scrofa domesticus)业最重要的传染病之一,疫苗免疫是防控口蹄疫的重要手段之一。由于口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)容易发生变异,致使候选疫苗株和流行毒株间的抗原不匹配,从而影响疫苗免疫效力和疫病预防效果。本研究根据结构蛋白VP1 (viral structural protein 1)基因序列和功能,以猪口蹄疫病毒O型毒株(O/MYA98/BY/2010株)灭活抗原为模板,扩增结构蛋白VP1基因,并与pSFV1载体连接构建重组质粒pSFV1-VP1。重组质粒经线性化、体外转录等方法处理获得的mRNA,转染BHK-21细胞并验证表达效果,然后与制备的脂质体纳米颗粒混合免疫豚鼠(Cavia porcellus),进行免疫应答水平和攻毒保护效果检测。结果表明,mRNA转染乳仓鼠肾(baby hamster syrian kidney-21, BHK-21)细胞24 h后,采用免疫荧光法(immunofluorescence assay, IFA)和Western blot法均证实VP1得到表达;mRNA疫苗免疫豚鼠后血清中特异性抗体、中和抗体、γ干扰素(γ interferon, IFN-γ)和白介素4 (interleukin 4, IL-4)均显著高于阴性对照组。试制的mRNA疫苗免疫豚鼠可以对50倍50%豚鼠感染量(50% guinea pig infectious dose, GPID50)的O/MYA98/BY/2010株攻击提供4/4保护。以上结果表明,试制的mRNA疫苗可以诱导较强的体液免疫与细胞免疫应答,免疫原性良好。本研究为研制口蹄疫紧急预防接种疫苗提供了新途径。

来源：2022年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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