农业生物技术学报

作者：杨酸, 谭光辉, 张依裕, 游敏芳, 廖朝美, 谭元成, 王盈童

单位：贵州大学 动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵阳 550025

关键词：三穗鸭,肌醇1,4,5-三磷酸受体2型(IP3R2)蛋白结构域,子宫内膜上皮细胞,Ca2+分泌,蛋壳品质,

基金：国家自然科学基金(31760663); 贵州省科技人才补助项目(黔科合平台人才[2017])(5788); 贵州省千层次创新人才项目(贵大千层次[2015]01)

肌醇1, 4, 5-三磷酸受体2型(inositol 1,4,5-triphosphate receptor type 2, IP3R2)是位于内质网的细胞内Ca2+释放通道,通过调控Ca2+释放而影响蛋壳品质。为阐明IP3R2蛋白结构域对鸭(Anas platyrhyncha domestica)子宫内膜上皮细胞Ca2+分泌的调控效应及其对钙转运相关基因的影响,本研究以蛋鸭品种三穗鸭为研究对象,构建IP3R2蛋白结构域的表达载体pCDNA3.1-IP3R2,转染至鸭子宫内膜上皮细胞,以Flag标签ELISA检测试剂盒确定IP3R2蛋白结构域的表达量;以Fluo-3/AM钙离子荧光标记检测胞内Ca2+含量;以qPCR检测不同结构域过表达量及离子转运相关基因的mRNA水平。结果显示,MIR、RYDR_ITPR(1)、RYDR_ITPR(2)、RIH_assoc和Ion_trans结构域过表达均引起鸭子宫内膜上皮细胞内Ca2+浓度下降;RYDR_ITPR(1)和IP3R2-Ion_trans的表达量与胞内Ca2+浓度显著负相关(P<0.05);RYDR_ITPR(2)、RIH_assoc和5个结构域共转染的表达量与胞内Ca2+浓度极显著负相关(P<0.01);RYDR_ITPR(2)结构域表达量与RYR2、KCNJ15和CA2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);MIR结构域过表达量与IP3R1、CALB1和CA2的基因表达量呈现显著正相关(P<0.05),2个RYDR_ITPR结构域过表达量均与KCNJ15和RYR2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);RIH_assoc结构域过表达量与IP3R2和ORAI1基因表达量呈显著正相关(P<0.05);Ion_trans结构域过表达量与CALB1、SLC8A1 和CA2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);5个结构域共转染后的表达量与CFTR基因表达量呈显著正相关、与TRPV6呈显著负相关(P<0.05)。上述结果提示,5个IP3R2蛋白结构域的过表达可能引起鸭子宫内膜上皮细胞内Ca2+向胞外释放,对细胞中20个离子转运基因表达水平的调控效应存在差异。本研究可为分子遗传标记选择和鸭蛋壳品质提高提供参考依据。

来源：2022年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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