农业生物技术学报

作者：张亚林, 胡得琴, 李源, 皇甫慧琳, 加恩力斯尼·那扎尔, 余睿, 刘小宁

单位：新疆大学 生命科学与技术学院/新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐 830046

基金：国家自然科学基金(31972279); 国家级大学生创新训练计划项目(202110755087); 新疆维吾尔自治区天山雪松计 划(2017xs02)

棉铃虫(Helicoverpa armigera)是一种杂食性害虫 ,可对多种农作物产量造成严重损失。目前 Bt 作物的大面积种植和化学农药的大量使用使得棉铃虫进化出应对杀虫剂和植物次生物质而保护自身的 防 御 机 制 。 为 了 开 发 绿 色 杀 虫 剂 ,对 棉 铃 虫 进 行 无 害 化 防 控 ,本 研 究 以 棉 铃 虫 细 胞 色 素 P450 (cytochrome P450 proteins, CYP) CYP6B6 启动子上响应 2-十三烷酮(2-Tridecanone, 2-TD)的核心序列 HE1 做 探 针 ,利 用 DNA pull down 技 术 筛 选 出 1 个 棉 铃 虫 正 性 调 节 区 锌 指 类 似 蛋 白 10 (positive regulatory domain zinc finger protein 10 like, PRDM10l)基因。对该基因进行克隆、生信分析和融合蛋白的原核表达, 同时利用 qPCR 检测其时空表达谱及 2-TD 胁迫下该基因在 6 龄棉铃虫中肠中的表达规律。结果显示 , HaPRDM10l (GenBank No. XM_021334552.1)的 ORF 为 2 067 bp,编码 688 个氨基酸 ,蛋白分子质量和理 论等电点分别为 77.96 kD 和 8.84。HaPRDM10l 在棉铃虫的不同发育阶段均有表达,在 5 龄幼虫中表达量 最高;在 6 龄幼虫不同组织中,中肠表达量最高。不同浓度的 2-TD 处理后,HaPRDM10l 和 CYP6B6 均能响 应 2-TD 的 诱 导 。 HaPRDM10l 在 10 mg/g 的 2-TD 处 理 12 h 时 表 达 量 达 到 最 大 值 ,为 对 照 组 的 7.6 倍 ; CYP6B6 在 5 mg/g 的 2-TD 处理 6 h 后表达量达到最大值,为对照组的 4.6 倍。相关性分析显示在 6 h 处理 组中 HaPRDM10l 和 CYP6B6 的表达呈正相关(r=0.749, P<0.01)。上述结果表明 HaPRDM10l 可能调控 CYP6B6 的表达以应对 2-TD 的胁迫。本研究为明晰棉铃虫应对植物次生物质的胁迫机制提供参考。 关键词 棉铃虫;正性调节区锌指类似蛋白 10 (PRDM10l);克隆;时空表达;2-十三烷酮(2-TD)

来源：2022年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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