农业生物技术学报

作者：袁雪梅, 徐铃威, 黄雷, 郝贵杰, 蔺凌云, 潘晓艺, 姚嘉赟, 沈锦玉

单位：1 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省鱼类健康与营养重点实验室/浙江省淡水水产研究所,湖州 313001;2 杭州市萧山区农(林)业技术推广中心水产站,杭州 311225

关键词：草鱼,重组干扰素,干扰素 &#x003b3, (IFN&#x003b3,),抗病毒活性,草鱼呼肠孤病毒(GCRV),

近年来 ,由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV)引发的草鱼出血病给该产业造成了严重 的损失。为探究重组干扰素对草鱼(Ctenopharyngodon idella)的免疫保护作用及其作用机制,本研究构建 草 鱼 干 扰 素 γ (interferon γ, IFNγ) 的 原 核 表 达 载 体 PET-30a-rCiIFNγ,并 转 入 大 肠 杆 菌 (Escherichia coli) Transetta (DE3)感受态细胞,经 IPTG 诱导表达及镍柱层析法纯化后获得重组蛋白 rCiIFNγ;通过细胞病变 效应(cytopathic effect, CPE)检测 rCiIFNγ 的体外抗病毒活性;进一步在攻毒实验中评价 rCiIFNγ 免疫对草 鱼体内抗 GCRV 感染的影响。结果显示 ,重组草鱼 IFNγ 融合蛋白(rCiIFNγ)分子量约 23 kD,纯化复性后 的 rCiIFNγ 抗病毒效价达 2.8×103 U/μg;rCiIFNγ 不仅能在体外抑制 GCRV 引起的细胞病变,还可以诱导草 鱼肝、脾、肾、肠中 IFN、IRFl、IRF7、Mx、PKR 和 STAT3 等干扰素激活基因的表达 ,并能显著降低 GCRV 攻 毒草鱼的死亡率。上述结果提示重组草鱼 IFNγ 融合蛋白 rCiIFNγ 具有明显的体内和体外抗 GCRV 效果。 本研究为草鱼 IFNγ 在抗病毒方面的应用提供了参考依据。

来源：2022年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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