农业生物技术学报

作者：史姿聪, 刘盼盼, 王新卫, 翟雪滢, 陈桦源, 刘红英, 马立静, 杨霞, 陈陆

单位：1 河南农业大学 动物医学院,郑州 450046; 2 宁夏大学 农学院,银川 750021

关键词：鸭源鸡杆菌,TolC蛋白,生物信息学分析,原核表达,免疫原性,

基金：国家自然科学基金(31302090); 河南省自然科学基金(162300410153); 河南省高等学校重点科研项目(22A230004)

tolC基因广泛存在于革兰氏阴性菌中,其表达的TolC蛋白(TolC family protein, TolC)是一种外膜通道蛋白,介导多种不同类型化合物的胞外转运过程,在细菌的生物学功能中发挥着重要作用。解析鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis) tolC基因特征及TolC蛋白的特性对于该病防控具有重要意义。为研究鸭源鸡杆菌tolC基因及其编码蛋白的结构特征和其作为抗原的潜能,本研究对28株鸭源鸡杆菌分离株tolC基因序列进行测定及系统发育分析;以PDS-RZ-1-SLG菌株为研究对象,利用生物信息学方法对TolC蛋白的理化性质及结构进行预测,并进行克隆、表达及抗原特性分析。结果表明,tolC基因在鸭源鸡杆菌中国分离株中普遍存在,全长1 371 bp,核苷酸序列高度保守,同源性为92.1%~100%,与鸡杆菌复合群(Gallibacterium genomosp) 1和2亲缘关系最近;TolC蛋白由456个氨基酸编码,理论分子质量为51.1 kD,是一个稳定的、亲水的α型分泌性膜蛋白,无跨膜结构域,但有1个信号肽序列和10个主要B细胞表位。SDS-PAGE和Western blot结果表明获得了约45 kD的重组蛋白,且该重组蛋白与鸭源鸡杆菌阳性血清可发生特异性反应,且能与TolC多克隆抗体兔血清发生特异性结合,证实了TolC的反应原性与免疫原性。本研究为进一步研究TolC蛋白生物功能提供基础信息,同时为鸭源鸡杆菌新型疫苗的开发提供理论依据。

来源：2022年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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