农业生物技术学报

作者：况文东, 占智高, 关丽梅, 王金昌, 闫成花, 陈俊晖, 李江怀, 周溪, 靳亮

单位：1 江西省科学院 微生物研究所,南昌 330096; 2 病毒学国家重点实验室,武汉 430071; 3 江西中医药大学 生命科学学院,南昌 330004

关键词：新型夹竹桃天蛾质型多角体病毒(DnCPV-23),Sf9细胞,病毒离体增殖,

基金：江西省科学院引进博士项目(2019-YYB-04); 江西省科学院协同创新专项普惠制一类项目(2019-XTPH1-04); 病毒学国家重点实验室开放研究基金(2019IOV001); 江西省自然科学基金资助项目(20192ACB20008)

新型夹竹桃天蛾质型多角体病毒(Daphnis nerii cypovirus-23, DnCPV-23)可杀灭多种天蛾科昆虫,具备开发新型昆虫病毒杀虫剂的潜力。目前,主要利用夹竹桃天蛾(Daphnis nerii)对该病毒进行研究,DnCPV-23在细胞中的复制情况尚不清楚。本研究将DnCPV-23病毒粒子接种至草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系Sf9中,分析该病毒在细胞中的复制情况。将病毒感染的细胞置于27 ℃条件下进行培养,利用光学显微镜观察病毒对Sf9细胞状态的影响;分别提取第1、3和7 d感染细胞的RNA,以其为模板进行反转录获得cDNA,利用qRT-PCR分析DnCPV-23 RNA水平;利用qRT-PCR方法分别对细胞培养上清液和病毒连续传代的细胞进行研究。结果显示,DnCPV-23能较好地适应Sf9细胞且成功感染Sf9细胞,并产生细胞病变效应(cytopathic effect, CPE);在细胞培养上清液中能够检测到病毒片段;病毒能够在Sf9细胞上进行传代。该研究为深入研究DnCPV-23入侵、转录机制、评价病毒毒力提供了良好的细胞模型,同时为新型天蛾科害虫病毒杀虫剂的开发提供一定的参考和依据。

来源：2021年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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