农业生物技术学报

作者：刘敏清, 王亚营, 何翃闳, 潘阳阳, 杨珊珊, 高泽川, 张同享, 赵凌, 王靖雷, 崔燕, 余四九

单位：甘肃农业大学 动物医学院/甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心,兰州 730070

关键词：牦牛,睾丸,水通道蛋白1基因 (AQP1),克隆,

基金：国家自然科学基金(31972760); 甘肃省教育厅产业支撑引导项目(2019C-03); 甘肃省教育厅创新能力提升项目(2019B-081)

本研究旨在克隆牦牛(Bos grunniens)水通道蛋白1 (Aquaporin-1, AQP1)的基因序列及研究AQP1在不同年龄牦牛睾丸组织中的表达。采集初生(3 d)、青年(1岁)、成年(4岁)和老年(8岁)牦牛的睾丸样品,通过RT-PCR技术扩增得到AQP1基因的cDNA全长序列,并对其进行生物信息学分析。采用qRT-PCR、Western blot和免疫组织化学(immunohistochemistry)方法在基因和蛋白水平对其进行检测和定位。qRT-PCR结果显示：随着牦牛年龄的增长,牦牛AQP1基因的表达水平呈先上升后下降的趋势,在青年睾丸中达到最高;在青年组中的表达量与其他组之间差异性均显著(P<0.05),而中年组与老年组差异不显著(P>0.05)。Western blot结果显示：随着牦牛年龄的增长,AQP1蛋白表达水平也呈现先上升后下降的趋势,在青年睾丸中达到最高;在青年组与其他组中的表达差异性显著(P<0.05),而初生组,中年组和老年组之间差异性均不显著(P>0.05)。免疫组织化学结果显示：AQP1蛋白在不同年龄牦牛睾丸中均有阳性表达,,主要表达在精子、精子细胞、各级生精细胞、睾丸间质细胞、支持细胞、管周肌样细胞和生精小管基膜中,各年龄表达位置基本一致。本实验结果表明,AQP1在青年组牦牛中的表达显著高于其他组(P<0.05),推测AQP1 在青年牦牛睾丸中发挥着重要作用。本研究为进一步研究AQPs在牦牛睾丸中的作用机制提供理论依据。

来源：2021年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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