农业生物技术学报

作者：张想军, 周学章

单位：宁夏大学 生命科学学院/西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,银川 750021

关键词：奶牛乳腺上皮细胞,炎性反应,肾素血管紧张素系统(RAS),血管紧张素转换酶2(ACE2),

基金：宁夏自然科学基金项目(2020AAC03074)

本研究旨在探索肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)中的表达定位及RAS对损伤的调节作用。用不同浓度脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理bMECs后,CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性,qPCR检测IL-1β、IL-6、 IL-8、TNF-α、ACE2、ACE、MasR和AT1R基因表达水平,酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测上清中AngⅡ和Ang 1-7含量;采用Western blot和细胞免疫荧光测定ACE2蛋白在bMECs中的表达和位置。实验结果表明,ACE2在bMECs中有表达,且定位于胞膜和胞浆;LPS处理bMECs 24 h后产生明显炎性损伤,IL-1β、IL-6、 IL-8、TNF-α、ACE、AT1R基因和Ang Ⅱ蛋白的表达随LPS浓度升高而增加,ACE2和MasR基因的表达随LPS浓度增加而先升高后降低,Ang 1-7蛋白的表达随LPS浓度增加而下降。本研究表明bMECs中存在ACE2、ACE、MasR、AT1R、AngⅡ和Ang1-7等RAS成员,且ACE2/MasR/Ang 1-7和ACE/AngⅡ/AT1R通路参与了LPS诱导的bMECs炎性损伤调控。本实验为研究RAS在乳腺炎中的调控作用及发掘抗炎药物作用新靶点奠定了基础。

来源：2021年第10期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

查看农业生物技术学报杂志2021年第10期