农业生物技术学报

作者：朱辰飞, 潘阳阳, 何翃闳, 赵凌, 王伟, 王彦雄, 崔燕, 余四九

单位：甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070

关键词：大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,细胞凋亡,奶牛子宫内膜上皮细胞(BEECs),

基金：甘肃省财政厅项目(032-041041); 国家重点研发计划(2017YFD0502200); 甘肃省农业科技创新项目(GNSW-2015-19); 甘肃省教育厅产业支撑引导项目(2019C-03); 甘肃省教育厅创新能力提升项目(2019B-081)

奶牛(Bos taurus)子宫内膜炎会对奶牛繁育能力造成显著影响,制约奶牛业发展。产后细菌感染是引起子宫内膜炎发生的首要病因,临床上分离出的主要致病菌为大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。本研究通过两步酶消化法体外培养奶牛子宫内膜上皮细胞(bovine endometrial epithelial cells, BEECs),以相应感染复数(multiple of infection, MOI)的不同浓度大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染BEECs,利用TUNEL试剂盒检测感染引发的细胞凋亡;在大肠杆菌或金黄色葡萄球菌感染细胞12 h后,利用qRT-PCR检测BEECs中细胞凋亡相关基因Bax、Caspase-3和Bcl-2的mRNA水平。免疫细胞化学鉴定显示,子宫内膜上皮细胞的标志蛋白(波蛋白和角蛋白18)染色阳性;大肠杆菌或金黄色葡萄球菌感染组中,细菌浓度为107 CFU/mL时细胞凋亡率最高;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染使Bax和Caspase-3表达增加(分别在106和107 CFU/mL时表达量最高),同时,Bcl-2表达降低(在107 CFU/mL时表达量最低)。本研究结果表明,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌可诱发子宫内膜上皮细胞凋亡,可为奶牛子宫内膜炎相关机制研究提供参考依据。

来源：2020年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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