农业生物技术学报

北大核心,CA,JST,CSCD,

国内刊号:11-3342/S

国际刊号:1674-7968

农业生物技术学报杂志2020年第7期:酸疮痂链霉菌实时荧光定量PCR检测体系的构建及应用

发布日期:

作者:陈利达, 谢学文, 石延霞, 柴阿丽, 潘好芹, 李磊, 李宝聚

单位:1 中国农业科学院 蔬菜花卉研究所,北京 100081; 2 潍坊科技学院,寿光 262700

关键词:马铃薯疮痂病,实时荧光定量PCR,定量检测,

基金:国家重点研发计划(2018YFD020080703); 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-IVFCAAS); 农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目

马铃薯疮痂病是国内外马铃薯(Solanum tuberosum)产区普遍发生的病害,严重影响马铃薯的产量和质量。本研究以马铃薯疮痂病病原菌—酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)的毒素基因序列设计特异性引物Aci-3/4,从酸疮痂链霉菌基因组DNA中特异性扩增出大小为192 bp的目的片段。灵敏度检测表明,建立的酸疮痂链霉菌实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测体系的灵敏度是常规PCR的1 000倍。对测试样品基因组DNA进行扩增的结果表明,qPCR检测病薯和病土DNA扩增的循环阈值(cycle threshold, Ct)均在25~32,而常规PCR未检测到病土DNA条带。本研究建立的酸疮痂链霉菌实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速、准确地检测马铃薯带菌病薯和土壤中酸疮痂链霉菌含量,可为马铃薯疮痂病早期监测和有效防治提供有效的技术手段。

来源:2020年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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