农业生物技术学报

作者：杨丽红, 吴小敏, 崔小芝, 吴巧群, 罗斌杰, 谌颖莲, 许厚强

单位：1 贵州大学 生命科学学院,高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵阳 550025;2 贵州大学 生命科学学院,贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵阳 550025;3 贵州大学 生命科学学院,贵阳 550025;4 贵州大学 动物科学学院,贵阳 550025;5 贵州大学 医学院,贵阳 550025

关键词：前列腺癌细胞,BLM解旋酶,Hippo信号通路,NONHSAT184603.1,

解旋酶BLM (bloom helicase)在细胞的增殖生长过程中有着重要的调控作用,YAP (yes associated protein)和TAZ (transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)蛋白作为哺乳动物Hippo信号通路下游的转录共激活因子和关键成分,参与调控细胞的增殖、凋亡以及迁移等多种生理过程,而长链非编码RNA (long non-coding RNA, LncRNA)在细胞的生长增殖过程中具有重要的调控作用。为探究LncRNA对BLM、YAP、TAZ表达的影响,本研究通过mirBase (http://www.mirbase.org/)、NONCODE (http://www.noncode.org/)及自主开发程序SWChen 2.3筛选与BLM解旋酶相关的LncRNAs,利用荧光定量PCR技术检测筛选的LncRNA在22RV-1、PC3、LNCap、WPMY-1四种细胞系中的表达情况,构建LncRNA超表达载体,检测转染后24及48 h LncRNA对BLM、YAP及TAZ的影响。本研究以筛选出的NONHSAT184603.1 (缩写为N183)(GenBank No. m121218_085412_00126_c100)为候选基因,荧光定量PCR检测结果显示,N183在前列腺癌细胞系22RV-1和LNCap细胞中的表达极显著低于前列腺正常上皮细胞系WPMY-1 (P<0.01),但在前列腺癌细胞系PC3中的表达极显著高于WPMY-1 (P<0.01);WPMY-1细胞转染N183超表达载体24 h后与对照组比较,BLM表达极显著下调(P<0.01),且TAZ表达也是极显著下调(P<0.01),转染48 h后BLM和YAP表达均极显著上调(P<0.01);PC3细胞在转染48 h后,BLM表达量显著下调(P<0.05),但YAP和TAZ表达差异不显著(P>0.05);以上结果表明N183在前列腺癌细胞及正常细胞中能够抑制BLM基因的表达,但对增殖指标基因YAP和TAZ的影响具有差异,为今后以BLM解旋酶为抗癌靶标对抗癌症提供基础数据。

来源：2020年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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