农业生物技术学报

作者：方远鹏, 蒋君梅, 杜巧丽, 陈美晴, 裴会敏, 屈志广, 任明见, 谢鑫

单位：1 贵州大学 农学院/国家小麦改良中心贵州分中心,贵阳 550025;2 黔南民族师范学院 生物科学与农学院,都匀 558000

关键词：高粱,SbSBP15,基因克隆,生物信息学分析,表达分析,

SQUA启动子结合蛋白-box (SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN box, SBP-box)基因家族编码一类植物特有的SBP转录因子,在植物界分布广泛,参与植物生长、发育、繁衍等多方面调控,包括胚胎发生、次生产物合成、胁迫应答等,在作物改良方面具有价值。本研究主要通过生物信息学以及实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)方法,对高粱(Sorghum bicolor) SbSBP15基因进行克隆和表达分析。研究结果显示,该基因CDS全长1 227 bp (GenBank No. MT634207),编码408个氨基酸。SbSBP15蛋白含有1个典型SBP结构域,相对分子质量为42.19 kD,等电点为8.87;与玉米(Zea mays)相应的同源基因亲缘关系最近;亚细胞定位主要在细胞核;具较强的亲水性;蛋白互作网络分析表明,SbSBP15可与蛋白激酶相互作用。qRT-PCR分析表明,SbSBP15在高粱茎中表达量最高,受干旱和盐胁迫诱导表达;植物激素吲哚乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)处理后其表达上调,而水杨酸(salicylic acid, SA)则抑制其表达。SbSBP15蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli) Rosetta (DE3)菌株的原核表达结果显示,0.8 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside, IPTG)于25 ℃诱导的表达量最高。本研究可为高粱分子遗传研究提供候选基因,为植物SBP15基因的生物学功能研究提供基础资料。

来源：2020年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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