农业生物技术学报

作者：刘鹏, 李伟, 许壮壮, 刘庆华, 王奎玲, 郝青

单位：青岛农业大学 园林与林学院,青岛 266109

关键词：牡丹'凤丹白',PoMYB1,表达特性,转录活性,

基金：国家自然科学基金(31601789); 山东省高等学校国家级大学生创新创业训练计划项目(20180435004); 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2015SW017)

授粉受精是影响植物结实的关键生殖过程,MYB (v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子是参与调控此过程的重要转录因子家族之一。本研究以油用牡丹'凤丹白' (Paeonia ostii 'Feng Dan Bai')为实验材料,从已构建的雌蕊转录组数据库中获得与MYB基因同源性高的Unigene序列,通过cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术分离得到完整编码序列,命名为PoMYB1 (GenBank No. MT360920)。该基因ORF长864 bp,编码287个氨基酸;蛋白分子式为C1434H2235N415O441S12,相对分子量为32.73 kD,等电点为7.01,脂肪系数68.99,不稳定系数48.18,属于不稳定蛋白。蛋白序列分析表明PoMYB1由高度保守且不完全重复的R2R3-MYB结构域构成,PoMYB1包含3个保守元件;系统进化分析表明PoMYB1与卵叶牡丹(P. qiui) PqMYB同源性最高,其次是杨梅(Morella rubra) MrMYB1,均属于S6亚组R2R3-MYB类型转录因子。利用qRT-PCR技术分析PoMYB1的表达特性,结果表明PoMYB1在萼片中的表达量最高,其次为叶片、花瓣,提示其在花和叶片发育过程中发挥着作用;其在授粉后24 h的雌蕊表达增量最大,授粉后48 h表达量达到最大值,推测其可能在双受精过程中发挥重要作用。构建包含PoMYB1 ORF区等3个不同缺失片段的酵母(Saccharomyces cerevisiae)重组载体,利用酵母单杂交技术验证PoMYB1的转录激活活性,结果表明,PoMYB1属于转录激活子,且转录调控域在C端。本研究为牡丹双受精过程的探究提供了理论依据,并为进一步研究牡丹PoMYB1转录调控机制提供了基础资料。

来源：2020年第10期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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