农业生物技术学报

作者：麦麦提艾力·阿卜杜纳斯尔, 李梦鸽, 包静, 随慧, 刘小宁

单位：新疆大学 生命科学与技术学院,新疆生物基因工程重点实验室,乌鲁木齐 830046

关键词：棉铃虫,几丁质酶,系统分类,&#x02166,型几丁质酶,酶学性质,

基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(No. 2016D01C042)和新疆大学大学生实训项目(No. 201810755013)

昆虫几丁质酶(chitinase, CHT)主要参与蜕皮、围食膜的降解、细胞增殖和机体免疫防御等重要生理生长发育过程。本研究从NCBI下载棉铃虫(Helicoverpa armigera)及其他昆虫的几丁质酶氨基酸序列,分析结构域和构建系统进化树,结果表明,棉铃虫的6个几丁质酶分别属于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ、Ⅷ型几丁质酶,1个几丁质酶属新的类型(new group)。到目前为止,Ⅶ型几丁质酶HaCHTⅦ研究较少,本研究克隆了HaCHTⅦ基因,在大肠杆菌(Escherichia coli) transetta(DE3)中表达和纯化了融合蛋白His-HaCHTⅦ,并测定了其对胶体几丁质和N-乙酰壳二糖底物的降解活性,结果表明,His-HaCHTⅦ对胶体几丁质没有降解活性,而对N-乙酰壳二糖具有降解活性,最适pH值和温度分别为7和25 ℃,动力学参数米氏常数(Km)和最大速率(Vmax)分别为0.486 2 mmol/L和2.715 1 µg/(mL·min),说明HaCHTⅦ在棉铃虫体内可能将寡聚糖降解为N-乙酰基葡糖糖,为合成新的几丁质提供起始底物而参与昆虫的生长发育。本研究结果将有助于更好地理解棉铃虫Ⅶ型几丁质酶的功能,也为害虫防治提供有益的信息。

来源：2019年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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