农业生物技术学报

作者：王靖雷, 王萌, 潘阳阳, 李秦, 何翃闳, 胡学权, 韩小红, 樊江峰, 崔燕, 余四九

单位：甘肃农业大学 动物医学院/甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心,兰州 730070

关键词：Artemin (ARTN),牦牛,繁殖周期,滋养层,

基金：国家重点研发项目(No. 2017YFD0502200)、国家自然科学基金(No. 31472244)、国家自然基金地区基金(No. 31660732)、国家自然科学基金青年科学基金(No. 31702311)、甘肃省青年科技基金计划(No. 17JR5RA141)和甘肃省重点研发项目(No. 17YF1NA058)

Artemin (ARTN)是胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)配体家族成员之一,在多种哺乳动物生殖道和早期胚胎发育过程中表达并参与早期胚胎的发育调节,但尚未明确其是否存在于牦牛(Bos grunniens)主要生殖器官和胚胎中。为探究正常生理条件下Artemin在牦牛发情周期及早期胚胎发育过程中的调控作用及生物学机制,本研究分别采集不同繁殖周期(卵泡期, 黄体期及妊娠期)牦牛的主要生殖器官(输卵管, 卵巢, 子宫),以及孤雌激活胚胎,利用qRT-PCR检测Artemin基因在组织和胚胎发育过程中的表达,同时利用蛋白质免疫印迹(Western blot, WB)、免疫组织化学方法以及免疫荧光染色方法,分析Artemin在各生殖器官和胚胎中的表达水平与定位。结果显示,Artemin在牦牛主要生殖器官和孤雌激活胚胎中均有表达,其中黄体期与妊娠期的输卵管和卵巢中Artemin表达均显著高于卵泡期;卵泡期和妊娠期子宫中Artemin的表达显著高于黄体期;孤雌激活胚胎中Artemin的表达在桑椹胚期最高,4~8-细胞与囊胚期次之,2-细胞期最低。免疫组织化学结果显示,Artemin在输卵管黏膜上皮、卵泡膜、卵巢生殖上皮、黄体细胞、子宫内膜和子宫腺体均有表达。免疫荧光染色结果显示,Artemin在牦牛囊胚滋养层有表达。本研究结果表明,Artemin参与牦牛发情周期和早期胚胎发育的调控作用。该研究结果为进一步探究Artemin的作用机制提供了基础资料,有助于牦牛胚胎体外培养技术的改进和牦牛繁殖能力的提高。

来源：2019年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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