农业生物技术学报

作者：卢圣菲, 冉雪琴, 牛熙, 黄世会, 王嘉福, 李升, 代新兰, 马鑫芮

单位：1 贵州大学 生命科学学院/动物科学学院/山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室,贵阳 550025;2 铜仁学院,铜仁 554300

关键词：印楝素,猪睾丸ST细胞,细胞凋亡,基因表达,

基金：国家高技术研究发展计划(863计划) (No. 2013AA102503)、国家自然科学基金(No. 31672390)、贵州省“百”层次创新型人才项目(黔科合人才2016-4012号)、贵州省科技创新人才团队(黔科合平台人才[2019]5615)和贵州省农业攻关项目(黔科合支撑[2017]2585号, 黔科合支撑[2017]2587号, 黔科合NY[2013]3073号)

印楝素(azadirachtin)是从印楝(Azadirachta indica)种子提取的植物杀虫剂,广泛应用于农田害虫防治。为了明确印楝素是否影响公猪的繁殖力,本研究采用猪(Sus scrofa)睾丸ST细胞(swine testis cells),通过MTT(3-(4, 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide)方法和流式细胞术,研究印楝素对猪睾丸细胞生长的影响,以实时荧光定量PCR方法检测印楝素对繁殖相关基因的影响。随着印楝素处理浓度的增加,ST细胞变圆脱落聚集;MTT实验证明印楝素以剂量依赖方式抑制ST细胞的生长,表现出细胞毒作用,24 h的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)为7.646 mg/L;流式细胞术检测到印楝素诱导ST细胞凋亡,8 mg/L印楝素引起的早期凋亡率明显高于5 mg/L处理组(P<0.05);基质金属蛋白酶15 (matrix metallopeptidase 15, MMP15)、蛋白激酶Cα相互作用蛋白(protein interacting with Cα kinase, PICK1)、骨形态发生蛋白6 (bone morphogenetic protein 6, BMP6)基因的表达量随印楝素处理浓度的增加而下降;突变同源蛋白4 (MutS homolog 4, MSH4)基因的表达量随印楝素处理的浓度而增加。综上所述,印楝素可抑制猪睾丸细胞的生长,诱导细胞凋亡,并影响繁殖相关基因的表达,提示印楝素可影响公猪的繁殖力。本研究为饲料中印楝素残留控制提供了理论依据。

来源：2019年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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