农业生物技术学报

作者：徐伟慧, 王恒煦, 赵井明, 王志刚, 王可昕

单位：1 齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院,齐齐哈尔 161006; 2 黑龙江理工生物科技有限公司,哈尔滨 150000

关键词：拮抗菌株,西瓜专化型尖孢镰刀菌,稳定性,抑菌能力,

基金：国家自然科学基金(No. 31700428)、黑龙江省自然科学基金联合引导项目(No. LH2019C068)和黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(No. 135209266)

由西瓜(Citrullus lanatus)专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. niveum, FON)引起的西瓜枯萎病是一种严重的土传病害,而一些拮抗菌株能有效控制西瓜枯萎病的发生。本研究以黑龙江省齐齐哈尔市青昕蔬菜基地作物根际土壤为材料,筛选西瓜枯萎病拮抗菌株,并探究其拮抗性能。采用平板对峙法筛选高效抑制FON的拮抗菌株,通过形态观察、生理生化特征、生防相关酶检测和16S rDNA序列分析进行种属鉴定;利用生长速率法研究拮抗菌株无菌发酵滤液在不同生长时期抑菌能力及不同条件下无菌发酵滤液的稳定性;利用扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope, CLSM)分析无菌发酵滤液对FON孢子形态和膜完整性的影响。结果表明,筛选到1株拮抗菌株WC,经鉴定为甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus),具有产淀粉酶、葡聚糖酶、蛋白酶以及铁载体的能力;其无菌发酵滤液在平稳期具有较高的抑菌能力,对FON菌落生长的抑制率为61.57%。无菌发酵滤液10 ℃处理30 min后对FON菌落生长抑制率最高为62.78%,其热稳定性较差;在酸碱性环境中稳定性较差,pH为7时抑菌率最高达74.54%;在4 ℃下可持续保存至少30 d,且对紫外线不敏感,可以保持稳定的抑菌活性。通过SEM和CLSM观察发现,经无菌发酵滤液处理后,FON孢子表面凹陷,细胞膜完整性受到破坏。综上所述,拮抗菌株WC对西瓜专化型尖孢镰刀菌具有较强的拮抗作用,在西瓜枯萎病生物防治中具有潜在的应用前景。

来源：2019年第12期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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