国内刊号:11-3342/S
国际刊号:1674-7968
发布日期:
作者:李华伟, 许泳清, 李国良, 张鸿, 崔纪超, 林赵淼, 邱永祥, 汤浩, 邱思鑫
单位:1 福建省农业科学院,福州 350003; 2 福建省农业科学院 作物研究所,福州 350013; 3 莆田市农业科学研究所,莆田 351106
关键词:甘薯,甘薯丛枝病,植原体,TaqMan探针实时荧光定量PCR,
基金:国家重点研发计划(2024YFD1401200); 福建省属公益类科研院所基本科研专项(2025R10290010); 国家现代农业产业技术体系(CARS-10-B14); 福建省省政府5511协同创新工程(XTCXGC2021005); 福建省农业科学院自由探索科技创新项目(ZYTS202407)
由植原体侵染引起的甘薯丛枝病(sweet potato witches'-broom disease, SPWB)是影响我国甘薯(Ipomoea batatas)生产的重要病害,尤其在东南沿海甘薯产区。为实现灵敏、快速地检测甘薯丛枝植原体及其传播媒体内的植原体,本研究以甘薯丛枝病植原体转运蛋白基因secY为特异靶标,设计相应的TaqMan探针和引物,建立针对该病原的TaqMan qPCR检测方法,并使用所建立方法对采集的甘薯病样、虫媒和感染植原体的不同甘薯组织进行检测。结果表明,建立的TaqMan qPCR检测方法可对甘薯丛枝病植原体进行灵敏、快速精确检测,检测下限为1.71×101 copies/μL,可特异性区分苦楝丛枝植原体(Melia azedarach witches' broom phytoplasma, MWB)(16SrⅠ-B)、槟榔黄化植原体(Areca catechu yellowing phytoplasma, ACY)(16SrⅠ-B)、长春花小叶植原体(Catharanthus roseus periwinkle little leaf phytoplasma, PLL)(16SrⅠ-A)、甘薯薯瘟病菌(Ralstonia solanacearum)和甘薯黑腐病病菌(Dickeya dadantii)。利用该方法定量检测感染植原体的甘薯不同组织,结果表明,病原体含量范围为3.98×104~6.03×105 copies/μL,明确了植原体含量最高的组织为甘薯茎和茎基部。利用该检测方法对田间虫媒进行定量检测,明确东洋网室叶蝉(Orosius orientalis)为甘薯丛枝病植原体的传播媒介。综上,本研究建立的qPCR检测方法灵敏度、特异性和重复性好,能够实现对甘薯丛枝病植原体的快速检测,而且能够为从病原定量水平上对甘薯丛枝病病情分级提供参考。
来源:2026年第2期
《农业生物技术学报》期刊编辑部