国内刊号:11-3342/S
国际刊号:1674-7968
发布日期:
作者:陈娜, 温逸俊, 邵勤
单位:1 宜春学院 生命科学与资源环境学院,宜春 336000; 2 宜春市科学院(江西富硒产业研究院),宜春 336000
关键词:青枯菌,酵母双杂交,cDNA文库,SlMYB86-like,互作蛋白,
基金:国家自然科学基金(32260776); 江西省自然科学基金(20232BAB215041)
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与植株对生物与非生物胁迫的响应过程。前期研究得出番茄(Solanum lycopersicum) SlMYB86-like (Solyc06g071690)转录因子能够响应青枯菌(Ralstonia solanacearum)的诱导并参与青枯病的抗性响应过程,但其分子调控机制尚不清晰。为筛选番茄在青枯菌侵染下与MYB转录因子SlMYB86-like互作的蛋白,以感病番茄BY 1-2为材料,分别提取接种青枯菌胁迫处理后0、3、6、9和24 h的番茄叶片的总RNA,等量混匀后构建番茄cDNA酵母文库,计算文库库容量、重组效率。同时,以SlMYB86-like为诱饵,利用构建的文库探索其在青枯菌侵染过程中的互作蛋白,并对其中可能参与病原菌防御反应的潜在蛋白在酵母中进行互作验证。结果表明,酵母文库的库容达到1.9×107 CFU,表现出完全重组(重组率100%),其平均插入片段长度大于1 000 bp。酵母双杂交共计筛选到44个与SlMYB86-like互作的潜在蛋白。进一步通过酵母回转验证,SlMYB86-like与转录因子维管植物单锌指蛋白1 (vascular plant one-zinc finger 1, VOZ1)、特奥辛特分支1、圆环藻以及增殖细胞因子15 (teosinte branched 1, cycloidea, and proliferating cell factors 15, TCP15)、E3泛素蛋白连接酶环指蛋白14 (ring finger protein 14, RNF14)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶D6蛋白激酶(D6 protein kinase, D6PK)、乙烯响应转录因子1 (ethylene-responsive transcription factor 1, ERF1)和钙依赖型蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases, CDPK)均存在互作。本研究可为进一步解析SlMYB86-like对番茄青枯菌病害的抗病分子机制提供实验依据。
来源:2026年第2期
《农业生物技术学报》期刊编辑部