农业生物技术学报

作者：蒋成辉, 茹毅, 郝荣增, 李亚军, 赵陇和, 杨洋, 卢炳州, 郑海学, 曾巧英

单位：1 甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070; 2 中国农业科学院 兰州兽医研究所/兰州大学 动物医学与生物安全学院/动物疫病防控全国重点实验室, 兰州 730046; 3 中农威特生物科技股份有限公司, 兰州 730046

关键词：口蹄疫病毒,原核表达,分子伴侣,表位疫苗,免疫原性,

基金：甘肃省自然科学基金重点项目(23YFNA0011); 甘肃省研产融合科技攻关赋能计划(25FNNA002); 国家自然科学基金(32372990); 甘肃省自然科学基金(23JRRA549); 中国农业科学院兰州兽医研究所所级基本科研业务费(1610312021013); 甘肃省科技重大专项计划(23ZDNA007); 国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/C03); 国家生猪产业技术体系(CARS-35); 中国农业科学院兰州兽医研究所所级基本科研业务费(161031202200

口蹄疫(food-and-mouth disease, FMD)是一种由口蹄疫病毒(Food-and-mouth disease virus, FMDV)引起的偶蹄动物烈性传染病,严重危害畜牧养殖业发展。为了研制新型口蹄疫表位疫苗,本研究以国内流行的猪(Sus scrofa) O型FMDV毒株(O/MYA98/BY/2010株)基因序列为基础,构建了包含7个B细胞表位和2个T细胞表位的重组表达质粒pColdⅡ-7B2T。重组质粒通过与分子伴侣TF16在大肠杆菌(Escherichia coli)中共表达,经亲和纯化、SDS-PAGE和Western blot鉴定,免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)并评价其体液和细胞免疫水平。结果显示,利用分子伴侣TF16成功制备的7B2T重组蛋白,以可溶性形式表达,分子量约为26 kD,并且能够与FMDV阳性血清发生特异性免疫反应。同时,7B2T蛋白能够诱导机体产生较强的特异性IgG,平均中和抗体滴度可达1∶96。此外,7B2T蛋白也能诱导小鼠产生较强的细胞免疫应答,有利于刺激脾脏CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群分化。淋巴细胞增殖试验和酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay, ELISPOTS)显示,7B2T蛋白处理组的脾淋巴细胞增殖水平和干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)斑点数极显著高于灭活疫苗(inactivated vaccine, IV)组和PBS组(P<0.01),白细胞介素-4 (interleukin-4, IL-4)斑点数与IV组水平相当。综上,本研究利用分子伴侣TF16制备的可溶性多表位7B2T重组蛋白,能够诱导小鼠产生较好的体液免疫和细胞免疫应答,为FMD多表位重组蛋白的制备和多表位疫苗的研制提供了思路和数据参考。

来源：2026年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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